每当夏日将至，人们就开始陷入到被蚊子支配的恐惧之中，小小的蚊子不仅让很多人饱受皮肉之苦，还会传播疟疾、登革热、丝虫病等危害性较强的传染病。因此，别看人类处在食物链的顶层，可几十年过去了，除了杀虫剂策略，我们仍然没有什么一劳永逸的办法对付蚊子。随着CRISPR 基因编辑革命的爆发，人们开始将目光聚焦于基因驱动，并期许借此系统改造蚊子、终结疟疾。

近日，《Nature Communications》杂志发表了一篇题为 Optimized CRISPR tools and site-directed transgenesis towards gene drive development in Culex quinquefasciatus mosquitoes的文章，研究人员专为蚊子开发了一种Cas9/guide-RNA 表达“质粒工具包”，以遏制“病媒”蚊子传播病毒的能力。

众所周知，gRNA和Cas9核酸酶是CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的左膀右臂，gRNA可识别目的DNA序列，指导Cas9在特定序列进行剪切，并依赖细胞本身的序列修复或外源基因的同源重组实现基因编辑，而基因编辑的特异性和位点选择依赖于gRNA中特异性识别序列的不同设计。

由此可见，gRNA作为一类非编码RNA对基因编辑至关重要，且需要III型RNA聚合酶通过转录方式合成。为此，如何快速地构建含有III型RNA聚合酶启动子“U6启动子”的gRNA表达组件至关重要。

基于此，为了评估新建的CRISPR/Cas9基因编辑工具的工作效率，研究人员分别在体外和体内环境中对在库蚊中表达 Cas9 和 gRNA 的“U6启动子”进行功能验证。研究发现，U6 启动子在体内外的活性一致。